Search
Nickel Columns and Nickel Resin | Bio-RadNickel columns are used for immobilized metal affinity chromatography (IMAC) for the purification of recombinant ... ... <看更多>
Nickel Columns and Nickel Resin | Bio-RadNickel columns are used for immobilized metal affinity chromatography (IMAC) for the purification of recombinant ... ... <看更多>
#1. 親和層析法
親和層析（affinity chromatography）也稱為功能層析（ ; 在實際操作上，若要純化的是某一種酶，則lignad選用此酶的競爭性抑制劑、受質（ ; 親和層析法使用的支持物種類，部 ...
#2. 親和層析 - 科學Online
親和層析(Affinity chromatography) ... 其原理像是酵素與其受質、抗體與抗原的關係，舉例來說，利用瓊脂糖(agarose)或是有孔洞的玻璃來夾帶親和配 ...
瞭解「親和性色層分析」之酵素純化原理與方法，並運用「固定金屬離子親 ... affinity chromatography，IMAC)的一種，主要是利用蛋白質的組織胺酸（histidine）.
#4. 2.4 親和層析法Affinity chromatography - ppt download
58 2.4 親和層析法Affinity chromatography 原理概述Basic principles 要有一對具有高親和性的分子 親和吸著劑Affinity adsorbent 有很多親和性吸著劑可利用 金屬螯合 ...
#5. Liquid Chromatography 液相層析課程
原理 : 膠體過濾(Gel filtration)或超過濾(Ultrafiltration). • 考慮除鹽樣品體積與目標分子 ... IMAC (Immobilized Metal Affinity Chromatography).
#6. 創世紀季刊_蛋白質純化.pdf
His-Tag 純化原理. Polyhistidine (His)-Tag 純化是屬於金屬親和層析法(immobilized metal-ion affinity chromatography，IMAC)的一種，主要是利用蛋白質的組織胺 ...
#7. 二、舉例說明親和層析法（affinity chromatography）之原理 ...
二、舉例說明親和層析法（affinity chromatography）之原理。要實施此分離純化之操作，須具備那些化學試劑及儀器設備？（20 分）
#8. 生物樣品之分析與純化層析基礎Chromatography ...
例如，粗(bulk)單株抗體純化通常從親和層析(affinity chromatography)開始，然後是離子交換(IEX) 層析。 ... RP層析的基本原理與HIC相同。
#9. 純化蛋白質(protein purification) - 小小整理網站Smallcollation
原理. 分子在其等電點時，容易互相吸引，聚合沉澱；加入鹽離子會破壞此吸引力，使分子散開，溶入水中 ... 親和性純化（Affinity purification）.
#10. 分離方式| Waters
正相層析分離的原理主要是利用做分析物與固定相表面極性官能基的交互作用，輔以非極性溶劑的使用來決定哪一方作用力強，而 ... 親和性層析(Affinity Chromatography).
#11. Cross-linking reaction
Protein Purification and Characterization Techniques ... 親和性層析法(affinity chromatography); 分離原理為利用蛋白質與固定於固定相配基(ligand)之特殊結合 ...
#12. 亲和层析的基本原理(Mechanism of Affinity Chromatography) - 大元 ...
亲和层析的基本原理(Mechanism of Affinity Chromatography). 答案解析. 1亲和的一对分子中的一方(配基)以共价键形式与不溶性载体相连作为固定相吸附剂。
#13. 親和色譜法 - 中文百科知識
英文翻譯親和色譜法affinity chromatography 基本介紹例如利用酶與基質（或抑制劑）、抗原與抗體， ... 概論一、液相色譜理論發展簡況色譜法的分離原理是：溶於流動相.
#14. 蛋白質純化簡介(中英對照譯文, from,WIKI ...
8.4 Affinity chromatography 親和層析 ... 8.4.3 Purification of a tagged protein 標記的蛋白質的純化 ... 其原理是, 較小的分子必須經過較大數量的多孔基質.
#15. AC是什么意思 - 英文缩写
英文全称Affinity Chromatography. 中文解释亲和层析. 缩写分类生物科学. 缩写简介又称功能层析(Function Chromatography)。其原理是：利用生物大分子与其特异性配基之 ...
#16. 親和色譜 - 中文百科全書
親和色譜色譜概述,原理,一般流程,特殊套用,影響因素, ... 親和色譜法( affinity chromatography),將相互間具有高度特異親和性的二種物質之一作為固定相,利用與固定相 ...
#17. Recombinant Protein | His-tag 重組蛋白純化系統
根據組氨酸上的咪唑環可以與二價金屬離子結合的原理，His-tag 可結合在目的蛋白的C末端或N末端，形成特殊的結構，以便於進行下一步的純化及檢測。
#18. 水質對HPLC分析的影響 - 實驗室純水
HPLC 的全名為高效液相色譜法(High Performance Liquid Chromatography)，是十分重要、常見的有機物分析方法。 原理是藉由固定相吸附流動相中的待測 ...
#19. 多聚组氨酸标签(His-tag)介绍及亲和层析原理
固定化金属离子亲合层析(Immobilized metal ion affinity chromatography, IMAC)，简称金属螯合亲合层析，是一种新型的应用于原核蛋白纯化的技术。该方法通过蛋白质 ...
#20. Ettan MDLC 多維液相層析系統
原理 的LC 技術來分離蛋白質或peptides, 例如帶電量, 親和性, 厭水性等. - 對於複雜性高, 含量低, ... Affinity Chromatography 常被用於Sample Enrichment,.
#21. 亲和层析(Affinity Chromatography)(1) - 分析行业新闻
亲和层析的基本原理生物分子间存在很多特异性的相互作用，如我们熟悉的抗原－抗体、酶－底物或抑制剂、激素－受体等等，它们之间都能够专一而可逆的结合， ...
#22. 亲和层析(affinity chromatography) - 生命经纬
生物分子间的这种结合能力称为亲和力。亲和层析就是根据这样的原理设计的蛋白质分离纯化方法。
#23. 亲和层析(affinity chromatography) - 食品伙伴网
... 的，又是可逆的， 改变条件可以使这种结合解除。生物分子间的这种结合能力称为亲和力。亲和层析就是根据这样的原理设计的蛋白质分离纯化方法。
#24. 蛋白質體學 - 陽明大學
（IEF）、以蛋白質大小即分子量作第二維電泳分離原理（SDS-PAGE）的二維電泳系統正式. 被開發出來。 ... 二、蛋白質親合性層析（Protein Affinity Chromatography）.
#25. 層析法
層析(chromatography). ❖ 層析原理. G層析是由俄國植物學家Mikhail Tswett發明與命名，他將 ... (affinity chromatography) ... 管柱層析(column chromatography).
#26. 第二章色層分析法原理
chromatography)。 5. 最近，又有一種新分離技術，利用不同組成分與固定相（固. 定化分子）的高專屬性親和力進行分離的技術稱為親和層析法. (affinity chromatography) ...
#27. 亲和色谱法
Affinity Chromatography. ホーム · 产品 · HPLC 色谱柱; 亲和色谱 ... 正如在抗体与抗原的相互作用中，选择性常常基于“锁钥” 的原理。 ... 亲和色谱法原理 ...
#28. 利用質譜與資料比對來鑑定蛋白質與peptide - 銘傳大學生物 ...
質譜技術的基本原理是樣品分子在離子化後，根據各個離子間的質荷比(m/z)的差異來分離並確定分子量。 ... 蛋白質親合層析（Protein Affinity Chromatography）。
#29. affinity chromatography - Chinese translation – Linguee
Many translated example sentences containing "affinity chromatography" ... 搜尋和簡報儀器分析的原理及其應用的資料，如以氣相色層法求出血液內的酒精含量y 利用 ...
#30. 色層分析法之原理與應用
色層分析( chromatography)簡稱層析。 ... 依分離原理分類. ▫. 吸附式層析法. ▫. 分配式層析法. ▫. 離子交換式層析法. ▫. 大小排除層析法. ▫. Affinity 層析法 ...
#31. 分配層析原理Distribution Chromatography - 人人焦點
親和層析原理(Affinity Chromatography). 親和層析法就是利用化學方法將可與待分離物質可逆性特異結合的化合物(稱配體)連接到某種固相載體上，並將載 ...
#32. affinity chromatography中文 - 軟體兄弟
3.4.1 原理概述Basic principles. 要有一對具有高親和性的分子. ○ 3.4.2 親和吸著劑Affinity adsorbent. 有很多親和性吸著 ... ,以affinity chromatography 進行詞彙 ...
#33. 蛋白质纯化原理(亲和层析) - BiliBili
#34. nickel column原理在PTT/Dcard完整相關資訊 - 小文青生活
Nickel Columns and Nickel Resin | Bio-RadNickel columns are used for immobilized metal affinity chromatography (IMAC) for the purification of recombinant ...
#35. 實驗室規則 - 清大生命科學系
原理 本實驗是針對氨基酸和蛋白質之α-氨基及羧基進行反應，其反應機轉如下： ... Affinity chromatography管柱中的solid medium上以共價鍵的方式接了特殊的ligand（稱 ...
#36. 1. 蛋白質雙硫異構酶（PDI） 2.胜肽脯胺酸順
親和層析法 （Affinity chromatography）. 基本原理; 所謂的親和力，乃生物大分子和其配體（ligand）之間形成可逆結合的能力，如酵素和它的受質（substrate）、抗體和 ...
#37. 亲和层析原理 - 海崴生物科技
亲和层析（Affinity chromatography， AC）是利用生物大分子和固定相表面的亲和配基之间可逆的 ... 亲和相互作用的原理可以用酶和底物相互作用的“锁钥学说”进行解释。
#38. 離子交換層析(Ion exchange chromatography)
液相色層層析分離(Liquid chromatography) ... Affinity chromatography is a method that overcomes limitation by ... 基本原理：.
#39. 收藏！15張動圖讓你秒懂色譜原理！
色譜（chromatography）是分析測試物質理化性質的常用的有效手段，多用於生物分子及高聚物的分離檢測等。色譜包含多種操作方式不同但原理相同的分離、 ...
#40. 亲和层析(affinity chromatography)_生物化学与分子生物学
亲和层析(affinity chromatography) ... 亲(qin)和层(ceng)析就是(shi)根(gen)据这(zhei)样的(de)(de)(de)原理设(she)计的(de)(de)(de)蛋白质分离纯化 ...
#41. Affinity precipitation求原理-萌萌鸡做题网
AFFINITY怎么样 Affinity Relationship Marketing affinity chromatography是什么意思 affinity reunion怎么翻译? elective affinity是什么意思 affinity maturation是什么 ...
#42. Intrgration of affinity chromatography on microfluidic chip for ...
近年來由於生物晶片技術的發展，加上微流體晶片具有體積小，檢測快速，只需少量試劑及樣品，和可以自動化等優點，所以應用在蛋白質學的各種分析方法已經 ...
#43. 亲和层析原理(Affinity Chromatography) - 教育装备采购网
亲和层析原理(Affinity Chromatography). 教育装备采购网 2016-12-19 10:38 围观1272次 我要分享. 亲和层析法是近年来广为重视并得到迅速发展的提纯、分离方法之一。
#44. 以pH 參數幫浦法分離純化trypsin 之研究[I] Research on ...
Keyword: affinity chromatograpHy, pH-parametric pumping, separation, purification ... 據一些酵素分子的特性設計而成，其原理乃是利用.
#45. 探討固定金屬親和薄膜對酵素之動力學參數 - 南亞技術學院
Chromatography (IMAC). Immobilized Metal Affinity membrane. (IMAM). 方法原理主要是利用固定於載體上的金屬離子作為路易士酸（Lewis acid），提供空價軌域，而胺基 ...
#46. 產品介紹--Phos-trap Phosphopeptide Enrichment Kit - 伯森生技
Phos-trap 磷酸化胜肽純化試劑是依據Metal Oxide Affinity Chromatography (MOAC) 原理所設計，其核心成份為表面帶有二氧化鈦(titanium dioxide, TiO2) 的磁珠，藉由 ...
#47. 亲和层析|仪表 - 微生物学笔记
Affinity Chromatography. ... It is a type of liquid chromatography. ... 亲和层析原理; 亲和层析的组分; 亲和层析的步骤; 亲和层析的应用; 亲和层 ...
#48. 從純化到星辰——CSH 蛋白質純化課側記-11 - 生物技術學
... 層析原理很簡單，利用蛋白質表面的帶電基團和resin上帶相反電荷的ion exchanger group 相互結合來純化蛋白。離子交換柱和affinity chromatography ...
#49. 蛋白纯化His-tag介绍、优势及原理 - 每日生物评论
金属螯合亲合层析，又称固定化金属离子亲合层析（Immobilized metal ion affinity chromatography, IMAC），是近30年发展起来的一种新型分离技术。
#50. 亲和色谱技术在天然药物研究中的应用
亲和色谱（ affinity chromatography，AC） 是利用生物分子 ... 的基本原理，利用色谱的差速迁移理论，实现样本的分离和. 分析的一种方法［4-5］。
#51. 臺灣眼鏡蛇神經毒重組蛋白非原生態結構 - 國立中山大學
Cobrotoxin的抗體可由affinity chromatography技術純化分離之(Yang ... 的反應性有何影響,利用ELISA 原理分析之. 如Fig. 12,control.
#52. 由溶質與靜相的作用力不同可以將層析法分成
離子交換層析法（ion-exchange chromatography）; 分子排除層析法（molecular exclusion chromatography）; 親和層析法（affinity chromatography）. P.480. 18- ...
#53. 磷酸化多肽的富集原理及相关富集方法的研究进展
In the past decade, in addition to the classic enrichment materials based on metal oxide affinity chromatography and immobilized metal affinity ...
#54. 第三章質譜技術與蛋白質體學Mass Spectrometry and Proteomics
出發點，介紹質譜儀的硬體設備、運作原理及蛋白質的鑑定技術，並簡介質譜技術搭配蛋白 ... IMAC（immobilized metal affinity chromatography）法則是利用Fe3+和Ga3+等 ...
#55. 轉寄 - 博碩士論文行動網
本研究利用電解質液體中的離子會在通電後形成梯度的原理，整合建構一個可通電 ... Affinity chromatography is a very popular technique for modern biochemists.
#56. 106 年特種考試地方政府公務人員考試試題 - 公職王
二、請描述下列色層分析（Chromatography）方法的原理與應用。（每題5 分，共20 分） ... 親和性色層分析法（Affinity chromatography）.
#57. 亲和层析(Affinity Chromatography)
亲和层析的基本原理 生物分子间存在很多特异性的相互作用，如我们熟悉的抗原－抗体、酶－底物或抑制剂、激素－受体等等，它们之间都能够专一而可逆的结合 ...
#58. 應用化學研究所- 碩士論文 - 國立交通大學
碩士論文. 於逆流層析中以具有親和性反微胞萃取蛋白質. 溶菌酶. Extraction of Lysozyme by Countercurrent. Chromatography Using Affinity-Based Reverse Micelles.
#59. 亲和层析(Affinity Chromatography) - 阿赐网
亲和层析的基本原理 生物分子间存在很多特异性的相互作用，如我们熟悉的抗原－抗体、酶－底物或抑制剂、激素－受体等等，它们之间都能够专一而可逆的结合 ...
#60. Gel Permeation Chromatography 膠體滲透層析儀 - SlideServe
儀器原理. 高分子聚合物大多為長鏈且分子量高的物質，但由於碳鏈和碳鏈之間結合的數目不相同，因此高分子分子量有一定的分布。 Gel Permeation ...
#61. thin layer chromatography 原理 - IJIP
Thin Layer Chromatography Principle Like other chromatographic ... The separation relies on the relative affinity of compounds towards both the phases.
#62. 柱层析蛋白质纯化方法学之综述 - 来邦网
An in-depth review of column chromatography for protein ... 离子交换层析分离蛋白的原理是基于其净电荷的不同，通过蛋白质与带电荷的固定相之间的 ...
#63. 亲和分离技术中亲和配基的研究进展
Key words: Specific adsorption affinity purification chromatography ligand ... 酸的咪唑基、半胱氨酸的巯基和色氨酸的吲哚基相结合的原理达到特异性结合的目的。
#64. G／L蛋白質／抗體純化相關產品－Biovision | 太鼎生物科技
http://www.biovision.com/protein-a-g-l-affinity-conjugates-related-products-1368/?osCsid= ... 品質佳：SDS-PAGE和HPLC純化，純度＞98％；內毒素＜0.1EU/mg.
#65. 亲和色谱,Affinity chromatography英语短句,例句大全 - X技术
Recent advances in aptamer affinity chromatography核酸适配体亲和色谱的研究进展 ... Separation固定金属离子亲和色谱——蛋白质分离的方法、原理、特性和应用
#66. 一种与金属离子具有更强结合力的蛋白纯化标签及其应用
... affinity chromatography，IMAC)。该方法利用蛋白质表面的一些氨基酸，如组氨酸、色氨酸、半胱氨酸等能和金属离子发生特殊相互作用的原理，从而对蛋白质加以分离。
#67. 亲和层析原理(Affinity Chromatography)_教育装备采购网
亲和层析原理(Affinity Chromatography). 教育装备采购网 2016-12-19 10:38 围观1261次 我要分享. 亲和层析法是近年来广为重视并得到迅速发展的提纯、分离方法之一。
#68. AC缩写的意思- 亲和层析
... 【英文全称】: Affinity Chromatography; 【中文解释】: 亲和层析; 【缩写分类】: 生物科学; 【缩写简介】: 又称功能层析(Function Chromatography)。其原理是： ...
#69. 國立嘉義大學100 學年度生物農業科技學系碩士班招生考試試題
別解釋下列三種常用的色層分析法的原理：(15 分). (a) Iion exchange chromatography,. (b) Affinity chromatography,. (c) Gel filtration chromatography。
#70. 2 資料介紹:
原理 是用雷射照射樣本(通常為人類血. 清、尿液或組織萃取物)與介質形成的共 ... (size exclusion chromatography)、親合層析法(affinity chromatography)、反相離子.
#71. 固定金属离子亲和色谱——蛋白质分离的方法、原理、特性和应用 ...
Immobilized Metal Ion Affinity Chromatography——Methods, Principles, ... Abstract： 介绍了固定金属离子亲和色谱法(IMAC)的方法原理、金属螯合柱的制备、固定金属 ...
#72. 查找： 關鍵字=immobilized metal ion affinity chromatography(IMAC)
查找： 關鍵詞為immobilized metal ion affinity chromatography(IMAC) 的文獻 ... 固定金屬離子親和色譜——蛋白質分離的方法、原理、特性和應用[J]. 化學通報.
#73. 第七章-蛋白质的理化性质及分离纯化主要学习内容及练习题
4、蛋白质分离纯化中几种层析的原理及应用. 5、几种常用电泳原理及应用. 主要练习题. 名词解释 ... Affinity chromatography Hydrophobic interaction chromatography.
#74. 膜亲和色谱的现状、发展和应用
文章对膜亲和色谱的原理、特点、设备、过程和发展情况做了介绍，... ... Current Situation，Development and Applications of Membrane Affinity Chromatography.
#75. Profinity IMAC 树脂
IMAC 是一种非常有效的分离技术，它利用组氨酸能够与金属离子发生亲和作用的原理对蛋白质加以分离。 ... Affinity Purification of Tagged Recombinant Proteins.
#76. 東吳大學108 學年度碩士班研究生招生考試試題
... 方法其原理為何? (15 分). (A) 膠體電泳( gel electrophoresis). (B) 離子交換層析法(ion-exchange chromatography). (C) 親和性層析法(affinity chromatography).
#77. 蛋白质的分离纯化_搜狗百科 - Sogou Baike
亲和层析法(affinitychromatography)是分离蛋白质的一种极为有效的方法，它经常只 ... 其基本原理：蛋白质在组织或细胞中是以复杂的混合物形式存在，每种类型的细胞都 ...
#78. 疏水性电荷诱导层析——原理 - 中国科技论文在线
Abstract：Hydrophobic charge induction chromatography（HCIC）is a new kind of ... [3] Scouten W H. Affinity chromatography ：Bioselective adsorption on.
#79. 药物高通量亲合色谱筛选中定性定量模型的建立
高通量药物筛选 ； 亲合色谱筛选法 ； 筛选原理与过程 ； 定性定量模型 ； high throughput screening of drugs ； affinity chromatography ； screening principle ...
#80. 手册
原理 和方法学手册 ... The trilogy: Individually download our three volumes of Affinity Chromatography handbooks ... Affinity Chromatography - Vol.
#81. 亲和层析原理和步骤课件_文档库
亲和层析Affinity Chromatography 一、原理亲和层析是利用生物大分子所具有的专一亲和力而设计的纯化技术寻找配基配基固定化制成亲和层析柱基本过程?固相.
#82. 固定化金属离子亲和色谱研究进展
chelate affinity chromatography，MCAC），由Porath 等[1] 于1975. 年提出，原理主要基于过渡金属离子（Zn2+、Cu2+、Ni2+等），在接. 近中性的水溶液中可特异性结合组 ...
#83. 課堂內容 蛋白質(protein) 蛋白質純化學生: 陳建良ppt download
24 Ion exchange chromatography R + A - + B - R + B - + A - 原理是依據物質所帶陰陽離子的 ... 26 Affinity chromatography 利用生物專一性, 特定蛋白質僅與特定受 ...
#84. 「fplc原理」懶人包資訊整理(1)
Affinity chromatography. FPLC. Preparative electrophoresis. Isoelectric focusing. (3) Hom ... 各種純化或分析方法的原理. 硫酸銨. 沈澱分劃. 細胞. ,Sample.
#85. 蛋白纯化His-tag介绍、优势及原理 - 360doc个人图书馆
金属螯合亲合层析，又称固定化金属离子亲合层析（Immobilized metal ion affinity chromatography, IMAC），是近30年发展起来的一种新型分离技术。
#86. 快檢試劑: 凌越生醫股份有限公司
快速檢驗試劑乃應用免疫分析檢驗技術及層析原理，將特定之抗體或抗原固定在硝化 ... 離子交換(Ion exchange chromatography)、親和性層析(Affinity chromatography)等 ...
#87. Weak Affinity Chromatography (WAC™ ) フラグメント ...
Weak Affinity Chromatography (WAC™ ) フラグメントスクリーニングサービス ... 目的タンパクをHPLCカラムに固相化（基本的にどのようなタンパクでも使用可能です） ...
#88. 閱讀文章- 精華區NTUCH-HW - 批踢踢實業坊
2.3.2.2affinity chromatography (1)這是一種adsorption chromatography ... 2.4用大小分離2.4.1原理(1)蛋白質分子量為10000-1000000Da，不同大小也可以用來分離。
#89. Exosome Research - 騰達行企業股份有限公司
利用Size exclusion chromatography 原理，可以大幅減少Albumin, Immunoglobin 的干擾. 若樣品來源為尿液，可選擇Exo-Urine EV Isolation Kit.
#90. ·专论与综述·
签（Si-tag，Halo-tag，自剪切标签等），介绍了它们的原理和应 ... 图3 Arg-tag 标签纯化蛋白的原理简图[12] ... immune-affinity chromatography purification.
#91. Pull-Down Assays | Thermo Fisher Scientific - TW
Affinity chromatography (i.e., affinity purification) methodologies greatly enhance the speed and efficiency of protein purification and simultaneously provide ...
#92. 【GST標誌蛋白質純化產品】Biovision, #6555-1GST-Tag親和 ...
【GST-Tag 純化原理】GST-Tag fusion protein 是使用glutathione S-transferase (GST) ... fusion protein with a GST tail can be easily purified by affinity
#93. 理化检验化学分册- 综述
摘要:文中介绍了生物、免疫、固定化金属离子拟生物几类常规亲和层析的原理及其在 ... Advances of Application of Affinity Chromatography to Research on Protein.
#94. 按溶质在两相分离过程的物理化学原理分类- 高效液相色谱HPLC技术 ...
（5）亲和色谱（Affinity Chromatography） 以在不同基体上，键合多种不同特性的配位体作固定相，用具有不同pH值的缓冲溶液作流动相，依据生物分子（氨基酸、肽、 ...
#95. 双柱连续流层析亲和分离抗体的过程设计与应用
1 前言; 2 双柱连续流层析原理; 3 材料和方法; 3.1 主要材料与仪器 ... cost of Protein A affinity chromatography, a twin-column continuous chromatography method ...
#96. 建立新的純化量產系統(20 公升-次以上)，製造抗台灣蛇毒血清
product was then purified with a SP cation exchange chromatography. ... 因此可設計親和式管柱(affinity column)或離子交換樹脂分離管柱.
#97. 15張酷炫動圖讓你秒懂色譜原理_EasyScience - 微文庫
導讀. 色譜（chromatography）是分析測試物質理化性質的常用的有效手段，多用於生物分子及高聚物的分離檢測等。 但是你瞭解色譜儀是如何工作的嗎？
affinity chromatography 原理 在 閱讀文章- 精華區NTUCH-HW - 批踢踢實業坊 的推薦與評價
1.簡介:分離不同層級蛋白質
分離技術是靠蛋白質不同溶解度 大小 電荷量 吸附性質 親附性(affinity)
2.蛋白質分離方法
(1)要先知道一些蛋白質性質:MW pI 溶解性 變性溫度
(2)第一部分離希望能應用在大量, 所以用溶解性差異來分
2.2.1原理
(1)蛋白質是一poly-electrolytes 所以其溶解性受到AA種類和電荷影響
(2)沉降法會是第一用的分離步驟
(3)蛋白質可以被選擇性池電透過改變其緩衝溶液pH ,離子強度,dielectric constant
temperature
2.2.2過程
2.2.2.1鹽析:中性鹽類水溶液中, 低濃度會增加蛋白質溶解程度，增加離子強度，會造成
沉澱。常用硫酸銨，因為它很容易溶於水，使用時分兩部驟：
(1)一開始先加到還沒把要的蛋白質沉降出來，其他不易溶的蛋白質先過濾。
(2)再加稍過量，讓要的蛋白質析出，但其他不要得依然留在水中。
(3)缺點:硫酸銨可能會汙染sample。
2.2.2.2等電點分離(pI)
(1)pI定義為當蛋白質在某pH值時不再帶電，該pH值即為該蛋白質的pI。
(2)蛋白質不帶電，斥力消失，會聚在在一起而沉降。
(3)蛋白質有不同pI，所以可以改變pH去分離，當某蛋白質pH=pI，這蛋白質沉降而不同pI
的蛋白質依然在水溶液。
2.2.2.3用溶劑分餾(solvent fractionation)
在固定pH、離子強度下，蛋白質溶解度和溶劑之介電常數有關，蛋白質可以透過其在水中
和有機溶液中不同溶解度去分離不同蛋白質。有機溶劑會降低胺基酸解離程度使胺基酸沉
降。通常要在0℃進行以免蛋白質變性，變性是因為有機溶劑和水混和而溫度升高。
2.2.2.4受污染的蛋白質變性
蛋白質加熱到某一溫度後或者把溶劑調成強酸強鹼就會變性。所以若蛋白質在高溫強酸強
鹼環境下很穩定的話，就可以用此法分離出所要的。
2.3用吸附法分離
(1)吸附層析是用化合物在表面吸附和脫附的不同性質分離。
(2)分離是靠不同的蛋白質對能吸附的固體和緩衝液不同吸引力而分離
(3)affinity chromatography或離子交換 chromatography 皆為adsorption
chromatography
2.3.2過程
2.3.2.1 離子交換 chromatography
(1)溶液中帶電的分子和離子會和固體基質進行可逆的吸附
(2)帶正電的基質被稱作陰離子交換器因為它會抓住溶液中帶負電荷的離子，帶負電的基
質被稱作陽離子交換器因為它會抓住溶液中帶陽電荷的離子。
(3)一開始所要的蛋白質會先吸附在交換器上，根據不同的離子強度、pH可以用此緩衝液
沖掉不要的蛋白質，之後再改變離子強度、pH之緩衝液將要的蛋白質沖出。
2.3.2.2affinity chromatography
(1)這是一種adsorption chromatography ，依據基質帶的不同ligand分離蛋白質。
(2)ligand定義為對蛋白質具可逆性、專一性、獨特親核性。
(3) ligand包括酵素抑制劑、酵素基板、共酵素、抗體、特定染料
(4)蛋白質會通過一個管柱含有ligand固定在固體基板上，在緩衝液條件下(pH、離子強度
、溫度、蛋白質濃度)將能使抓蛋白質效果最好。
(5)不要的蛋白質會被沖掉，之後再改變pH、離子強度、溫度，將要的蛋白質脫附。
2.4用大小分離
2.4.1原理
(1)蛋白質分子量為10000-1000000Da，不同大小也可以用來分離。
(2)分離是以Stokes radius為基準，不是分子量，Stokes radius是蛋白質在溶液中的構
形的平均半徑，若是globular，其半徑和Stokes radius接近，但若是fibrous 或rod狀會
差很多。
2.4.2過程
2.4.2.1 透析(dialysis)
(1)Dialysis 用半透膜讓小分子可以通過，大分子則不可以來分離
(2)將蛋白質溶液放到袋子內，密封放進buffer內，低分子量得透析出去，分子量高的留
下。
(3) 透析操作簡單，但很耗時而且因為滲透壓的關係，蛋白質溶液會被稀釋。
2.4.2.2 membrane process
可以用microfiltration、ultrafiltration、nanofiltration、逆滲透方式，這些都是用
半透膜的方式去分離，但比透析快且應用於高份量的分離。
2.4.2.3 size-exclusion chromatography
(1)用蛋白質大小來分離。
(2)管柱靜相是多孔的珠珠組成，分子比珠子中的孔洞還大排除在外，比較快流出管柱，
所需時間短，小分子會進到孔洞所以花的時間比較長。
(3) size-exclusion chromatography都用來移除鹽分、改變緩衝液、分開蛋白質和估計
質量。
(4)可以用已知質量的物質去測流出時間作減量線，對未知物測流出時間就可以推測其質
量。
2.5 電泳
2.5.1 polyacrylamide gel electrophoresis
2.5.1.1原理
(1)電泳是透過給一個電場使帶電分子移動，對蛋白質而言，給電場讓不同的蛋白質再固
體聚合物中分離成一個一個band，該聚合物為ＧＥＬ
(2)分離是靠著蛋白質和基質的摩擦力和本身的電荷造成，蛋白質的mobility會隨著
Stokes radius增加而減少
Mobility= (applied voltage)(net charge on molecule)/(friction of the molecule)
(3)蛋白質會帶正電或負電，這要看蛋白質自己的pH pI，當溶夜pH> pI 蛋白質”-“
pH< pI 蛋白質”+“
(4)在未變質前，蛋白質是靠自己的物性例如帶電量、大小、形狀而分離。
(5)用於分離變性的蛋白質是PAGE和帶負電的介面活性劑(SDS)，蛋白質會先在SDS溶夜和
還原劑中變成小單元，還原劑有mercaptoethanol 或dithiothreitol，是用來還原S-S 鍵
，蛋白質被SDS抓住會帶負電，之後再被分離。
(6)不連續的gel是用來改善解析度，他含有stacking gel 是有大孔洞的，resolving gel
有小孔洞，stacking gel用來濃縮蛋白質讓它變一個很窄的band，泳動到不同pH之
resolving gel會造成不同蛋白質分的更開。
(7)會再需要加一些染料去追蹤分離，這邊加的是bromophenol blue tracking dye ，他
會跑的比蛋白質快，定義Rm=(蛋白質從起點走的距離)/(dye從起點到終點距離)
2.5.2 isoelectric focusing
2.5.2.1原理
(1)主要著重在用蛋白質的不同電荷去分離，需要用兩性物質去建立pH gradient。
(2)蛋白質會遷移到一個地方，這個地方其pH=pI，這時蛋白質因為不再帶電所以不會再移
動，可以將pI 值差0.02的蛋白質也分離出來。
2.5.2.2 過程
(1) 用兩性電解質(ampholytes)造出pH gradient ，ampholytes 在還未聚合前就要加入
gel 溶夜，等gel生成給電流，就會產生pH gradient ，負的ampholytes到正極，正的
ampholytes到負極。
(2) isoelectric focusing和SDS-PAGE組合起來就可以做2-D的電泳。先讓蛋白質到其pI
=pH之位置，在另一個維度給電場，會依不同質量而分離。
2.5.3 毛細管電泳
2.5.3.1 原理
蛋白質可以因其大小和帶電荷量而在電場下分離，毛細管電泳和一般電泳不同之處在於毛
細管電泳直接將acrylamide gel 度在毛細管內，靠EOF(electroosmotic flow
)來分離
2.5.3.2 過程
electroosmotic flow會影響蛋白質分離，當pH>3帶負電的fused silica會吸引正電而形
成電雙層，會干擾管壁和緩衝液，當施加電場，陽離子流就會往負極跑，跟著也會帶動其
他帶正電、帶負電、不帶電的分子一起往前跑，但帶+-電的吸引力不同造成分離效果。
EOF可藉由改變pH 離子強度來改變管壁上silica帶電情形影響泳動速率。
3.AA(amino acid) 分析
3.1原理
AA分析要決定蛋白質組成成分，蛋白質樣品先被水解釋放AA之後再分離
3.1.2分離
(1)用6N HCl煮24小時水解蛋白質，但真的要得到很精準的結果很困難，因為大家反應不
太一樣。
(2)tryptophan 會被破壞。Met Cys Thr Ser水解時會逐漸被破壞，asparagine
glutamine會變成aspartic acid glutamic acid
... <看更多>